Kullanım Şekli

Toplam 72 saat sürecek kan kromozom kültürü yapmak için bir plastik tüp içine 0.5 ml heparinli tam kan 5-10 ml kandan kromozom analizi için geliştirilmiş özel medium ile birlikte konarak inkübe edilir.

1.     İnkübasyonun 48. saatinde, 0.1 ml MTX solüsyonu çok hafif bir şekilde karıştırmak sureti ile kültüre eklenir, 17 saat inkübe edilir.

2.     17 saat sonra, kültür tüpü vorteksleme işlemine tabii tutularak Thymidin solüsyonundan 0.1 ml eklenek inkübe edilir. Bu iki işlemin pratik ve zaman kazandırıcı şekilde yapılması için, MTX solüsyonunun öğleden sonra, Thymidin solüsyonunun ertesi sabah eklenmesi önerilir.

3.     5,5 saat sonra 0.1 ml colcemid solüsyonu eklenir.

4.     Eğer uzun ve prometafaz kromozom isteniyorsa, 10-20 dakika sonra toplanır. Eğer yüksek mitotik indeks isteniyorsa, 30-50 dakika sonra toplanır.

5.     Kültür bir santrifüj tüpüne aktarılır ve 500 g de 5 dakika santrifüj edilir. Süpernatant atılır ve hücreler 5-10 ml hipotonik KCl solüsyonu ile resüspanze edilir. 37C de 10-12 dakika inkübe edildikten sonra 500 g de 5 dakika santrifüj edilir. Süpernatant atılır hücre sedimenti sonraki işlemler için kullanılır.


 
Dr. ZEYDANLI Hayat Bilimleri Tic. Ltd. Şti.• Oguzlar Mahallesi 1392. Sokak 21/5 06520 Balgat Ankara • Tel: 0312 285 85 40 • Fax: 0312 285 85 41
e-mail: info@drzeydanli.com.tr

Web Tasarım: AdaNET